原理

自适应聚焦声学™（AFA）是一种先进的声学技术，可通过超声波聚焦仪器对样本进行机械处理。 AFA采用高度控制的聚焦高频声能脉冲，在温度控制和非接触环境下有效且可重复地处理样品。在AFA中使用的超高频超声波波长仅几毫米，使声能能够聚焦到样品器皿内的离散区域。这种专注且高效的传递使需要的能量输入zui小化，以避免过量能量的不利影响，例如破坏性热量，实验变异性和样品过度处理这些普通超声波仪器的典型问题。 

用AFA超声波能量进行样品处理是通过控制样品容器内数百万个空化气泡的产生和塌陷来完成的。当声能穿过含水介质时，压力波动发生，在相对低的压力区域形成小空腔（或气泡）。空化气泡可以振荡或增长到临界尺寸，然后塌陷。空化气泡的振荡和塌陷产生声学微流，从而在样品中产生流体动力学剪切应力。Covaris AFA™聚焦超声波仪可以精确控制传送到样品的声学脉冲。峰值功率，持续时间和duty factor的调整控制微流控制，进而控制剪切力的产生。 

AFA可用于处理各种应用中的样品，从小功率的溶液温和混合和蛋白质提取到高功率应用，如片段化DNA，脂质体形成和纳米悬浮液的制备。

Q1.哪些非离子去垢剂与AFA配合良好兼容？

A1：Triton X-100：曲拉通X-100

   Octylglucoside (octyl-beta-D-glucopyranoside)：辛基葡糖苷（辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷）  

   NP-40：乙基苯基聚乙二醇

   Tween-20：吐温-20

Q2.Covaris是否为LC/MS分析提供含有缓冲液的替代洗涤剂？

A2：Covaris蛋白质提取缓冲液DF是一种不含去垢剂的缓冲液，可有效提取蛋白质，并且与LC / MS分析兼容。  

Q3.我可以在哪种缓冲液类型中剪切DNA？

A3：我们推荐 Tris-EDTA pH 8.0 缓冲液 （TE）， 以便在各种 DNA 片段大小下获得一致的结果。

Q4.为什么我在剪切DNA时没有得到一致的结果？

A4：不一致的结果可能是由几个不同的因素引起的，但是，首先要检查的重要事项如下：

样品体积：每个耗材都针对特定的样品体积进行了优化，以实现最佳性能。例如，大顶空的存在允许偶尔在管中形成气隙，破坏DNA的一致片段化到所需的大小范围。单击此处查找仪器协议，其中包括针对不同体积的仪器特定推荐样品容器。

水位：水位对于DNA剪切至关重要。水不仅允许声能从换能器耦合到管中，而且在处理过程中将样品保持在适当的温度并最大限度地减少可能导致玻璃管破裂的振动也很重要。每个仪器和耗材都会发布要遵循的确切水位，请单击此处以获取最新信息。

水浴温度：水温应与应用紧密控制并匹配。温度升高会降低样品流体内声腔的震荡力，导致平均片段尺寸变大，因此应严格控制DNA剪切过程中的水浴温度。

水浴脱气：对于 S、E 和 LE- 系列乐器，浴槽内的脱气水平不足可能导致声耦合效率降低，从而改变平均片段大小。系统脱气泵应提前运行，并在AFA处理期间运行。在运行过程之前，应将水浴脱气至少30分钟至一小时，直到可以无误地检查SonoLab软件中的“脱气”指示器。

水的纯度：藻类和颗粒等异物可能会散射高频聚焦声束，导致平均碎片尺寸发生变化。洗澡水应为纯蒸馏水或去离子水，每天更换或由Covaris水调节系统清洁。

Q5.Covaris是否有仪器的操作Protocols？

A5：Covaris提供一些参考的仪器对应操作Protocols，具体如下：

Quick Guide: DNA Shearing with ME220 Focused-ultrasonicator 

Quick Guide: DNA Shearing with M220 Focused-ultrasonicator 

Quick Guide: DNA Shearing with S220 Focused-ultrasonicator

Quick Guide: User Manual: g-TUBE

Quick Guide: g-TUBE for DNA Shearing

Quick Guide: Covaris-certified Consumable Guide